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测量IgG的ELISA试剂盒,在使用中的注意事项及临床意义

点击次数:831   发布时间:2014/11/3 11:13:53

 【影响因素】
1.标本不应有脂血、溶血、黄疸。 
2.一般采用成品试剂盒进行检测,要注意试剂盒质量;抗原与抗体的比例合适,防止hook效应的发生;各种器皿如比色杯等要清洁。 
3.实行标准化操作,各种实验条件一旦确定不应轻易改变,同时要加质控品以保证结果准确可靠。

【临床意义】
血清Ig测定是观察体液免疫功能*常用的方法,临床一般同时检测IgG、IgA和IgM水平,以便全面了解患者病情。 
1.人类IgG有四个亚型IgG1、IgG2、IgG3和IgG4,主要由浆细胞合成分泌,在人体五种血清Ig中IgG含量,约占Ig总量的75%~80%,血浆中半衰期为20~23d。血清Ig含量正常人之间个体差异很大,且随年龄等不同而发生变化。IgG是惟一能够通过胎盘的抗体,因而新生儿IgG与母体水平相近,随后逐渐下降。出生3个月降至水平,3个月后开始自身合成,3~5岁达到成人水平。IgG是再次免疫应答的主要抗体,大多数抗细菌、抗病毒、抗毒素抗体、某些自身抗体、Ⅱ型及Ⅲ型超敏反应抗体均属于此类,在机体抗感染、中和毒素等免疫防御中发挥重要作用。 
2.IgA大部分是由胃肠道淋巴样组织合成,少部分来自局部呼吸道、涎腺、生殖道黏膜以及产妇乳腺组织细胞等。新生儿仅含有极微量IgA,出生后4~6个月开始合成,4~12岁达成人水平。IgA有IgA1IgA2两个亚类,IgA1主要存在于血清中,约占血清IgA总量的85%,IgA2主要存在于初乳、唾液、泪液、胃肠液、支气管等外分泌液中,是黏膜局部免疫*重要的因素。 
3.IgM是由五个单体组成的五聚体,又称为巨球蛋白,占血清Ig总量的10%。新生儿血清中仅含有0.1g/L,以后迅速升高,1岁左右即可达到成人水平。IgM是体液免疫应答过程中*先产生的抗体,在补体参与下其溶血能力比IgG强500倍以上,且通过补体C3b、C4b发挥调理吞噬作用,在机体早期免疫防御中发挥重要作用。 
4.血清Ig增高:Ig增高可分为多株性和单株性。 
①单株性Ig增加多见于骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤,这种Ig又称为M蛋白。根据M蛋白种类不同分为:IgG型骨髓瘤、IgA型骨髓瘤和IgM异常增高的原发性巨球蛋白血症。②结节病IgG、IgA、IgM均升高。③结缔组织病如SLE以IgG增高为主、IgA、IgM也可增加;类风湿性关节炎IgM增高为主。④在肝脏疾病中,慢性活动性肝炎主要为IgG升高,肝硬化时IgG和IgA显著增加,肝硬化合并肝癌时IgG和IgA增加更为显著,胆汁性肝硬化以IgM升高为主;⑤冷免疫球蛋白血症:单株型通常以IgG或IgM型多见,IgA型少见;混合型常见为IgG-IgM型。⑥重链病:μ重链病、α重链病均属于IgA1型、Υ重链病多属于IgG1型和IgG3型。 
5.血清Ig减少: 
①霍奇金病IgG、IgA、IgM均下降;②Bruton无丙种球蛋白血症,血清中IgG、IgA、IgM、IgD、IgE均显著降低,Ig总量<2.5g/L,IgG<2.0g/L;③婴儿暂时性低丙种球蛋白血症,总Ig<3.5g/L,以IgG缺乏为主,IgA、IgM一般下降不明显,1.5~3岁恢复正常;④多样性低丙种球蛋白血症,总Ig<3.0g/L,IgG<2.5g/L,IgA、IgM缺乏或极少,常伴感染、自身免疫病和恶性肿瘤;⑤IgM正常或升高的性联低丙种球蛋白血症,IgM正常或显著升高达1.5~10g/L,IgG、IgA显著降低或缺乏;⑥选择性IgG亚型缺乏症,可有四种亚型不同组合的缺陷,如选择性IgG2和IgG4缺乏,血清Ig总量正常或略低,IgA、IgM正常;⑦选择性IgA缺乏症,*为常见,IgA<0.05g/L,IgG和IgM正常,IgM可代偿性升高;⑧选择性IgM缺乏症,IgM低于0.1~0.2g/L,甚至缺如,IgG、IgA正常;⑨重症联合免疫缺陷病,出生6个月内除尚有部分来自母体IgG外,其他Ig均极低;⑩伴Ig合成异常的细胞免疫缺陷病,Ig可有一种或数种降低,但IgM升高;(11)伴有共济失调、毛细血管扩张的免疫缺陷病,大部分患者IgA缺乏,部分IgG、IgM降低;(12)Wiskott-Aldrich综合征,早期以体液免疫缺陷为主,IgM下降,IgA升高,IgG正常;(13)Good综合征,IgG、IgA、IgM均显著降低

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