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高尔基染色(扫描)

高尔基染色(扫描)

价格:电议 型号:

原产地:中国大陆发布时间:2021/9/15 10:02:13

高尔基染色(扫描)
解决部分较厚的组织聚焦不清晰,制片过程中贴片不平整等导致扫描模糊聚焦不清等问题。

采购度:368

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详细内容

本产品仅供科研实验,不得用于医疗或食用。 高尔基染色(扫描)

Golgi-Cox浸染法是研究神经元和胶质细胞正常和非正常形态*有效的方法。使用Golgi技术,在药物处理过的动物脑中和因神经疾病死亡的病人脑中发现了神经树突和树突微小的形态改变。

神经元细胞、胶质细胞、神经树突棘呈黑色,背景淡黑色或无色

 

送样运输要求:

样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。

切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。

 

基于神经元的嗜银特性,高尔基染色可将神经元的轴突或树状突起染成黑色后,使树突棘可视化,是研究神经元和胶质细胞形态*有效的方法,另一方面,树突范围小、突触棘短而少,意味着发育差,神经传递慢。

高尔基染色通过使用重铬酸钾和铬酸钾,氯化汞作为初步固定剂浸润组织,铬盐和神经细胞中的蛋白质结合,氯化汞通过白色沉淀来标记单个细胞,进一步经过碱处理,使沉淀物变黑(硫化汞)。

 

主要实验步骤:

1.提前一天等量混合溶液A和B,取上清液进行后续实验;

2.实验动物进行深度麻醉,并尽快地从颅骨中取出动物的脑(不能灌注,灌注会造成阴性结果),放入A和B混合液,避光,室温14天;

3. 14天后,把组织小心移入溶液C,室温黑暗至少72小时(可长达1周)。24小时后或次日至少更换一次溶液;

4. 组织用纸沾干,稍裹一些OCT,在用干冰降温的-70度异戊烷里冻硬,铝纸包好,负80度存放;

5. 用OCT 或水包埋组织,并切片(厚度80-200um);

6. 染色:(整个过程中和盖盖玻片之前的任何一步都不要让切片变干)用双蒸水冲洗切片两次,每次4min;把切片置于由1份溶液D,1份溶液E和2份的双蒸水组成的混合液中10min(碱化,工作液现配现用);蒸馏水冲洗切片两次,每次4min(蒸馏水应频繁更换新的);50%,75%和95%的乙醇中对切片进行脱水,每个浓度梯度脱水4min然后在无水乙醇中对切片进行脱水,4次,每次4min(不要延长时间);在二甲苯中透明3次,每次4min,*后用树脂封片剂对盖玻片进行封片。

数据的统计主要分析在树突复杂性(dendritic complexity),包括树突分支数(number of dendritic branch)、树突长度(dendritic length)、树突棘密度(dendritic spine density)等。其中,Sholl 分析(以胞体为圆心,不包括胞体同心圆,计算交点个数)是常用的分析方法。



 

 

更新时间:2023/11/7 12:14:01

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