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免疫荧光检测(IFC)服务及相关生物学代测服务

免疫荧光检测(IFC)服务及相关生物学代测服务

价格:电议 型号:

原产地:中国大陆发布时间:2013/7/3 15:00:33

免疫荧光检测(IFC)定义:将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。免疫荧光检测(IFC)服务及相关生物学代测服务

采购度:1312

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标签:免疫荧光   免疫代测   

详细内容

本产品仅供科研实验,不得用于医疗或食用。

免疫荧光检测(IFC)服务及相关生物学代测服务

免疫荧光检测(IFC)

分类:免疫荧光检测分直接法、间接法、夹心法和补体法。

一般试验方法:

直接法

将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。

间接法

  如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(第二抗体)与抗原标本反应,使之形成抗原—抗体—抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体,则表明抗原标本是已知的,待检血清为抗体,其它步骤的抗原检查相同。

 

直接法一般实验步骤:

 

  1) 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。

 

  2) 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。

 

  3)取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。

 

  4)取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。

 

  5)立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:

 

  (-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。

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间接法一般实验步骤:

   1)滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于已知抗原标本片,10min后弃去,使标本片保持一定湿度。

 

  2)滴加以0.01mol/L,pH7.4的PBS适当稀释的待检抗体标本,覆盖已知抗原标本片。将玻片置于有盖搪瓷盒内,37℃保温30min。

 

  3)取出玻片,置于玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗1-2次,然后按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸5min,不时振荡。

 

  4)取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,滴加一滴一定稀释度的荧光标记的抗人球蛋白抗体。

 

  5)将玻片平放在有盖搪瓷盒内,37℃保温30min。

 

  6)重复操作3。

 

  7)取出玻片,用滤纸吸去多余水分,滴加一滴缓冲甘油,再覆以盖玻片。

 

  8)荧光显微镜高倍视野下观察,结果判定同直接法。

 

服务内容

提供免疫荧光染色服务,并对染色后结果进行显微照相。

样品要求

石蜡切片/冰冻切片/细胞爬片。
目的蛋白一抗。


终产品

染色后的切片;
每张切片提供一张照片;
实验报告。

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更新时间:2023/11/7 12:11:20

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