小鼠TNF-a ELISA试剂盒现货供应,小鼠肿瘤坏死因子a试剂盒供应

发布时间:2013/5/27 11:47:42

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公司名称:上海信帆生物科技有限公司 型 号: 生产地址:中国大陆 已获点击:1235 简单介绍: 上海信帆生物有限公司专业供应各类ELISA试剂盒,种属齐全,指标众多。小鼠TNF-a试剂盒,小鼠TNF-a ELISA试剂盒现货供应
详细内容

小鼠TNF-a试剂盒,小鼠TNF-a elisa试剂盒现货供应

试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
25 ng/L-800 ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆,细胞上清液,组织等液体样本中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。用纯化
的小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中
依次加入肿瘤坏死因子α(TNF-α),再与HRP 标记的肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体结
合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶
的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死
因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲
线计算样品中小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(1600 ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
800 ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
400 ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
200 ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
100 ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
50 ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间*
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,*做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
 
上海信帆生物,专业代理销售各种"小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒",产品质量佳,服务优!欢迎联系!咨询电话:

更新时间:2019/7/10 16:40:46


标签:肿瘤坏死因子α   TNF-α   小鼠TNF-α   
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