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技术文章

植物类黄酮检测试剂盒的技术参数

点击次数:9180   发布时间:2023/12/1 9:14:08

 植物类黄酮检测试剂盒的技术参数

一、测定意义:

类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人

体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症

等作用

二、测定原理:

在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在502nm

有特征吸收峰的红色络合物,测定样品提取液在502nm处的吸

光值,即可计算样品类黄酮含量。

三、仪器设备(自备):

烘箱、粉碎仪、研钵、筛子、60%乙醇、离心机、可见分

光光度计、60℃震荡恒温箱。

四、试剂组成:(50T/48 样)

提取液:60%乙醇,自备。

试剂一:液体2mL×1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体2mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体25mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:标准品粉剂 1mg×1支,使用时加入1mL 60%乙醇,

60℃恒温振荡10分钟使其溶解,配成mg/mL

标准应用液。

五、操作步骤:

1、类黄酮提取:

干样:将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.02g

加入2mL 提取液,60℃震荡提取2小时,10000g,室温

离心10min,取上清,待测。

鲜样:将植物用生理盐水清洗后,将表面水分擦干,剪碎,

液氮研磨成粉状,称取约0.05g,加入2mL提取液(含

量低可酌情减少提取液量),60℃震荡提取2小时,

10000g,室温离心10min,取上清,待测。

2、操作表:

 

注:正式实验前取1-2例相对差异较大的样本进行预试,

ΔA测定大于1时需要稀释样本上清后再测定。

六、计算公式:

制作标准曲线:将1mg/mL标准液用60%乙醇稀释成

0.1mg/mL0.08mg/mL0.06mg/mL0.04mg/mL

0.02mg/mL几个浓度按操作表标准管及空白管进行实验,

得出OD值后绘制标准曲线,如下:

 

则计算公式为:

类黄酮含量(mg/g=ΔA测定-0.0141÷9.0771×提取液总体

积(2mL÷样本质量(g

七、技术参数:

1、试剂盒检出限为1μg/mL,如果ΔA测定值大于1,则需将样本

上清液作适当稀释以后测定;

2、本试剂盒回收率可达95%-100%,稳定性好,准确性高;

3、标准品配置时温度低会使其溶解缓慢,60℃振荡溶解时需

密封好,防止液体溢出造成损失;

4、假如没有分光光度计,也可用酶标仪进行测定,波长不变

(或者在±10nm波动范围内选择)。

 植物类黄酮检测试剂盒的技术参数

原创作者:上海信帆生物科技有限公司

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