信帆生物为您提供总胆固醇检测试剂盒的样本处理方法

点击次数：6414 发布时间：2018/5/8 10:24:28

上海信帆生物为您提供总胆固醇检测试剂盒的样本处理方法！我司销售各类生化试剂盒，包括胆固醇，甘油三酯，低密度脂蛋白，高密度脂蛋白等，欢迎大家来电咨询！

1、样本处理:

①、血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。

②、培养液样本：吸取培养液，1000 转/分，离心 10 分钟，取上清测定。

[注]：一般建议细胞密度在 100 万个/ml 以上。

③、组织样本：准确称取组织重量，按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆介质，冰水浴条件下机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液待测。

[注]:1、如组织样本为非高脂样本，匀浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。 2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本，匀浆介质可统一用无水乙醇进行提取。

④、细胞样本：

A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出，1000 转/分，离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用等渗缓冲液（推荐 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液）清洗 1～2 次，同样 1000 转/分，离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；

B、细胞破碎:加入 0.2～0.3ml 的匀浆介质（推荐 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液或生理 盐水）进行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率 300W，3～5 秒/次，间隔 30 秒,重复 3～ 5 次)或手动匀浆，制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解( 推荐 TritonX-100,1～2%,裂解 30～40 分钟)，裂解好的液体不离心直接测定。