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技术文章

小鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒产品简介

点击次数:9868   发布时间:2017/11/22 16:45:18

 小鼠D二聚体(D2D)elisa试剂盒产品简介


使用目的:

本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中D 二聚体(D2D)含量。

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠D 二聚体(D2D)水平。用纯化的小鼠D 二
聚体(D2D)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入D 二聚体
(D2D),再与HRP 标记的D 二聚体(D2D)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过
彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化
成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的D 二聚体(D2D)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长
下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠D 二聚体(D2D)浓度。

操作步骤:

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
1.6ng/ml 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
0.8ng/ml 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
0.4ng/ml 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
0.2ng/ml 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
0.1ng/ml 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

 小鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒产品简介

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6 个月

 小鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒产品简介

原创作者:上海信帆生物科技有限公司

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