褪黑素（Melatonin MT），是松果体分泌的一种吲哚胺类激素，分子量为232.3 De, 其主要生物学作用：（1）传递光暗信号，使生物的各种内源性节律与环境周期保持同步；（2）有效清除生物体内的自由基，使机体免受氧化损伤；（3）褪黑素与钙调蛋白结合，调节细胞骨架的机能状态，以执行特定的机能；（4）具有镇痛、镇静、催眠及调节神经系统、内分泌系统、保护消化道，促进睡眠和毛皮生长的激素。

主要应用范围：

* 抗衰老、抗癌症作用的机制研究；

* 心脑血管、神经系统、内分泌系统疾病方面的研究；

* 免疫功能、生物节律方面研究的参考；

* 生长发育、性功能和许多器管起调节作用的指标。

试剂盒组成：

１、缓冲液1瓶；

２、褪黑素标准（冻干品）5瓶；10，50，100，200，400pg/ml

３、 ¹²⁵I-褪黑素2瓶；

４、褪黑素抗血清2瓶；

５、分离剂1瓶；

样品收集：取静脉血2ml ，注入试管中待凝固后，分离血清，-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融，混匀后，4℃ 3000rpm/ min离心5 min，取上清测定。

测定方法： 本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：

MT RIA加液程序（单位： ul ）

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试剂 T NSB B₀ S₁~S8 样品

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缓冲液 —— 100 100 —— ——

标准品 —— —— —— 100 ——

样品 —— —— —— —— 100

抗体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I-MT 100 100 100 100 100

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充分混匀，室温放置1小时，置4℃冰箱过夜。

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分离剂 —— 500 500 500 500

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振荡混匀后，4℃冰箱放置1小时，4℃，4000 转/分离心45 min，弃上清液，测沉淀cpm数。

结果计算：

以N/T、B/T计算NBS、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值。或由自动γ计数器预先编制程序，直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

注意事项：

本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

正常值：正常人空腹46.1±11.2pg/ml(X±SD).

本药盒主要技术参数：

1、NSB<5%

2、标准范围：0-400 pg/ml

3、灵敏度：<0.5pg/ml

4、精密度：批内变异系数：CVw<4.5 %,

5、批间变异系数：CVw <8.5%

6、平均回收率:97.5%

7、正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

46.1±11.2pg/ml(n=188)。

有效日期：1个月

褪黑素放射免疫试剂盒操作说明书

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