人 β- - 连环蛋白（ β- - catenin ）酶联免疫分析（ELISA

点击次数：427 发布时间：2019/7/17 16:53:46

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· 资料简介：本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关
液体样本中β-连环蛋白（β-catenin）含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人β-连环蛋白（β-catenin）水平。用纯化的
人β-连环蛋白（β-catenin）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加
入β-连环蛋白（β-catenin），再与 HRP 标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体
复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸
的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的β-连环蛋白（β-catenin）呈正相关。
用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人β-连环蛋白（β
-catenin）浓度。
试剂盒组成：
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置保存
说明书 1 份 1 份
封板膜 2 片（48） 2 片（96）
密封袋 1 个 1 个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品：450pg/ml 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
显色剂 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
显色剂 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
20 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 30ml×1 瓶 2-8℃保存
样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上
清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心
20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次
离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/
分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞
浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分
2
钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待
检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上
进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。