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点击次数:742 发布时间:2018/2/28 17:32:06
质控菌种-生孢梭菌 CMCC(B)64941 震撼来袭!
微生物检测冻干质控菌种生孢梭菌标准菌株CMCC(B)64941使用说明书
1 复苏菌种生孢梭菌标准菌株CMCC(B)64941前应准备适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。
2 启开菌种前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开塑盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞,加入0.3mL左右的配套液体培养基,用无菌滴管反复吹吸,将冻干菌种溶解成为悬液,然后用无菌滴管或接种环移至斜面、平板或液体培养基,并连同剩余菌悬液的西林瓶一起放置于36℃培养箱中进行培养。(菌种与培养和保存方法对应表见附表1,培养基、培养方法和传代保存方法见附表2)。
3 次日观察菌种的生长情况,如未生长,应继续培养24h,或吸取培养之后的菌悬液中再次接种培养基,培养24h观察。
4 菌株为一次性使用品,开启之后不能反复使用或保存,暂不开启的菌种应在4℃保藏。
5 复苏后的菌种在传1-2代后使用,建议菌种使用5代后弃用。
注):购买后请尽量及时使用冻干菌种,如发现菌种不活或污染等情况,请在购买之日起1个月内与我们联系。
冻干菌种生孢梭菌标准菌株CMCC(B)64941复苏示意图:
附表2 培养基、培养条件和保存方法
质控菌种-生孢梭菌 CMCC(B)64941 震撼来袭!
方法1:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂(022020)斜面上35-37℃划线培养24-48h。斜面(代)放于4℃冰箱保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法2:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂(022020)斜面上划线35-37℃培养24-48h。斜面(代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法3:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于血平板(024070)后涂布,35-37℃培养24-48h。平板(代)放于4℃冰箱保存,并用封口膜或其它封条密封平板,每半个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法4:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE)(026020)斜面上 35-37℃培养24-48h。斜面(代)放于4℃冰箱保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法5:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于疱肉牛肉粒肉汤(027140)加液体石蜡1cm,35-37℃培养48-72h。肉汤(代)放于4℃冰箱环境下保存,每半个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法6:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入碱性蛋白胨水,充分悬浮后取适量的菌悬液于碱性琼脂(025040)斜面上35-37℃培养24-48h。斜面(代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法7:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入3%NaCl碱性蛋白胨水,充分悬浮后放置于36℃下复苏8-12小时。取适量的菌悬液于3%NaCl营养琼脂(营养琼脂(022020)加入2.5gNaCl/100mL)斜面上35-37℃培养24-48h。斜面(代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
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