大鼠IV型胶原（ColIV）ELISA检测试剂盒的性能有哪些！

点击次数：2127 发布时间：2021/10/14 17:04:34

大鼠IV型胶原（ColIV）ELISA检测试剂盒的性能有哪些！
胶原是一种纤维状糖蛋白，它是由三股螺旋体形成的α-肽链网状结构。已发现胶原达10种之多，存在于不同组织。Ⅳ型胶原是构成基底膜的重要成分。
产品名称：大鼠IV型胶原（ColIV）ELISA检测试剂盒
产品规格：96T
储存条件：2-8℃，避光防潮保存
有效期：6个月
本产品仅供科研实验用，不做其它用途！
检测原理：
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠IV型胶原（ColIV）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并撤底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠IV型胶原（ColIV）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒性能：
1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：zui低检测浓度小于1.0ng/ml。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
实验步骤（仅供参考）
1.  从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.  待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。