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β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)测定试剂盒的操作过程

点击次数:81   发布时间:2023/12/6 9:32:46

  β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)测定试剂盒的操作过程

 测外源型 比色法)

一、测定原理:

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidaseβ-GD)作用于专一性底物释放出游离的酚酞,用比色法测定游离

酚酞的量表示酶的活力。

二、试剂的组成和配制(50T/48 样):

试剂一:粉剂×3 支;临用前每支粉剂中加入 1.0mL 试剂二(外源性),充分混匀后-20℃以下保存;

试剂二(外源性):液体 15mL×1 瓶;4℃保存;

试剂三:液体 100mL×1 瓶;4℃保存

试剂四:1umol/mL 酚酞标准 1mL×1 支;4℃避光保存。

三、操作过程:

1、前处理:

10%组织匀浆上清液的制备:准确称取组织重量,按重量(g:体积(mL=1:9 的比例,加入 倍体积的

生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,2500 /分,离心 10 分钟,取上清液进行

测定。

2. 操作表:

 

四、计算公式及举例:

1、单位定义:每毫克组织蛋白在 37℃条件下,每分钟能催化生成 1μmol 的酚酞的酶量就是 个酶活力单位。

2、计算公式:

五、测定意义:

β-葡糖醛酸苷酶广泛存在于机体组织中,除肝、脾、肾上腺外,胃肠道粘膜含量也较丰富,它具有水解

固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖的生理功能。胃癌组织内此酶活力要显著高于十二指肠溃疡的胃组织,胃癌组织

内此酶含量丰富,主要分布于癌细胞内;胃癌患者胃粘膜表面覆盖着具有此酶强活力的膜状物。这样当含丰富

酶的癌细胞破碎时,胞浆中此酶即进入胃液。测定胃液β-葡糖醛酸苷酶活力对于研究胃癌有重要的意义。

 β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)测定试剂盒的操作过程

 

原创作者:上海信帆生物科技有限公司

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