检测目的
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中转化生长因子β1(TGF-β1)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人转化生长因子β1(TGF-β1)水平。用纯化的人转化
生长因子β1(TGF-β1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入转化
生长因子β1(TGF-β1)，再与HRP 标记的转化生长因子β1(TGF-β1)抗体结合，形成抗体-抗
原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝
色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1(TGF-β1)呈
正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人转化
生长因子β1(TGF-β1)浓度。
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样本实验准备
在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后
当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-
20℃备用，有条件的，-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集
上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离
心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再
次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/
分）。仔细收集上清。
5. 培养细胞：检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100
万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再
次离心。
6. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试
剂，用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上
清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
7. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进
行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
8. 不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
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