葡聚糖凝胶LH的使用方法

点击次数：4056 发布时间：2022/12/22 11:41:23

葡聚糖凝胶LH的使用方法

上海信帆生物供应多种葡聚糖凝胶，价格优惠，库存充足，深受广大用户青睐。

葡聚糖凝胶 LH 系列是将葡聚糖凝胶羟丙基化，并且专门适合用于有机溶剂分离嗜脂性分子，天然产物在有机溶剂中的纯化，例如类固醇，萜类化合物，脂质和低分子量肽。

流动相的常用溶剂为：水、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷。上述溶剂的极性依次降低，对带有极性的被分离物而言，保留值和分离度依次递增；同理选用的凝胶柱高可依次降低，流速可以增大（或上样量可以增加，树脂体积在低极性溶剂中明显收缩）。
溶剂的溶解性，极性，沸点，毒性都是要考虑到的，二氯甲烷通常对被分离物质间的极性和碱性差异比较小时采用。甲醇通常对带环状(包括苯环)物质分离采用，葡聚糖凝胶 LH 系列对环状物质有强烈吸附，同时具备亲水和亲脂双重性质，且被分离物质的极性在分离过程中起着重要作用。

项目指标：形状球形，多孔粒径（干粉） 100-200 目流速 150 cm/h 工作温度 4~40 ℃ 耐压 0.2MPa pH 值稳定性 2~13(短时间，在位清洗) pH 工作范围 3-12 化学稳定性在大多数含水和有机洗脱液系统中稳定。在 pH 2 以下不稳定，对强氧化剂也不稳定。
1 填料的准备
（1）葡聚糖凝胶 LH 系列以干粉形式存在，使用前必须溶胀，在膨胀期间应避免过度搅拌，不要使用磁力搅拌器，溶胀的程度将取决于所使用的溶剂体系，在室温条件下至少溶胀 24 个小时。（2）将溶胀好的填料，所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度。
2 装柱（1）检查层析柱所有部件，特别是过滤网，密封圈，螺旋塞是否紧密，玻璃管是否干净和完整。
（2）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位，务必使底端无气泡。（3）用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。（4）打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过，使柱床稳定（注意压力不要超过填料耐压）。
注意：上述装柱方法可用于葡聚糖凝胶 LH 系列在大多数溶剂中的填充。在一些溶剂中，例如氯仿，葡聚糖凝胶 LH 系列比溶剂密度小，并在其中漂浮，则需用其他方法。
3 平衡上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止。
4 上样样品一定要离心或过滤后（0.45um 滤膜）上样。样品体积应在总柱床体积的 1-2％的范围内，视分离情况可以调整，柱高的选择也与分离要求相关，柱长越高，分离效果相应越好，但是，柱高过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制。
5 洗脱一般来说，流速越低，分辨率越好。
6 再生通常通过用 5-10 倍柱体积的洗脱液洗涤柱，如果改变条件，需要用新的洗脱液重新进行平衡操作。
7 保存未使用的填料，室温密闭保存。使用完的填料，用纯水将盐分彻底冲洗，*后保存在 20%乙醇中，4℃ 保存。
8 注意事项：（1）上样之前，样品必须经过膜过滤及去除色素，否则杂质及色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。所有的缓冲液均需要用 0.45um 的过滤器过滤。（2）在使用过程中，避免使用高浓度的强酸强碱，酸和碱的浓度应低于 0.1 摩尔。碱会使流速变慢。（3）不同的样品，吸附和洗脱方法不相同，可以根据相关的文献进行

葡聚糖凝胶LH的使用方法